Avaliação do perfil fenotípico das células B de pacientes com esclerose múltipla: comparação com os transtornos do espectro da neuromielite óptica

Silva, Júlio César Costa da

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Centro de Ciências Biológicas e da Saúde (CCBS)
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dc.contributor.advisor	Bento, Cleonice Alves de Melo
dc.contributor.author	Silva, Júlio César Costa da
dc.date.accessioned	2026-04-07T14:45:42Z
dc.date.available	2026-04-07T14:45:42Z
dc.date.issued	2025-08-21
dc.identifier.citation	SILVA, Júlio César Costa da. Avaliação do perfil fenotípico das células B de pacientes com esclerose múltipla: comparação com os transtornos do espectro da neuromielite óptica. 2025. 119 f. Dissertação (Programa de Pós-Graduação em Biologia Molecular e Celular) – Universidade Federal do Estado do Rio de Janeiro, Rio de Janeiro, 2025.	pt_BR
dc.identifier.uri	http://hdl.handle.net/unirio/14991
dc.description.sponsorship	Fundação Coordenação de Aperfeiçoamento de Pessoal de Nível Superior (CAPES)	pt_BR
dc.language.iso	Portuguese	pt_BR
dc.rights	openAccess	pt_BR
dc.title	Avaliação do perfil fenotípico das células B de pacientes com esclerose múltipla: comparação com os transtornos do espectro da neuromielite óptica	pt_BR
dc.title.alternative	Evaluation of the phenotypic profile of B cells in patients with multiple sclerosis: comparison with neuromyelitis optica spectrum disorders	pt_BR
dc.type	masterThesis	pt_BR
dc.contributor.advisor-co	Lopes, Lana Márcia Ferreira
dc.contributor.referee	Bento, Cleonice Alves de Melo
dc.contributor.referee	Albuquerque, Cassiano Felippe Gonçalves de
dc.contributor.referee	Oliveira, Erick Esteves de
dc.degree.department	CCBS	pt_BR
dc.degree.grantor	Universidade Federal do Estado do Rio de Janeiro - UNIRIO	pt_BR
dc.degree.level	Mestrado Acadêmico	pt_BR
dc.degree.local	Rio de Janeiro, RJ	pt_BR
dc.degree.program	Programa de Pós-Graduação em Biologia Molecular e Celular	pt_BR
dc.subject.cnpq	CIÊNCIAS BIOLÓGICAS	pt_BR
dc.subject.cnpq	IMUNOLOGIA	pt_BR
dc.subject.cnpq	IMUNOLOGIA CELULAR	pt_BR
dc.subject.en	Central Nervous System	pt_BR
dc.subject.en	CNS	pt_BR
dc.subject.en	Multiple Sclerosis	pt_BR
dc.subject.en	MS	pt_BR
dc.subject.en	Neuromyelitis Optica Spectrum Disorder	pt_BR
dc.subject.en	NMOSD	pt_BR
dc.subject.en	B Cells	pt_BR
dc.description.abstracten	Characterized by both myelin destruction and axonal degeneration, demyelinating autoimmune diseases (DAD) of the central nervous system (CNS) present with typical lesions associated with neuroinflammation driven by innate immune cells (microglia/macrophages) and adaptive immune cells (T and B lymphocytes) targeting antigens expressed by neurons as well as by local accessory cells, oligodendrocytes and astrocytes. Among the main CNS DADs, relapsing-remitting multiple sclerosis (RRMS) is the most prevalent, though not the most severe. Although less common, patients diagnosed with neuromyelitis optica spectrum disorders (NMOSD) have poorer outcomes, a finding associated with a greater contribution of B cells. While RRMS is considered a DAD primarily mediated by IL-17⁺ autoreactive T cell subtypes, recent studies have linked B cells to the progression of RRMS to the secondary progressive form, characterized by irreversible neurodegeneration. Considering the existence of B cell subtypes, the present study aims to map immunogenic and tolerogenic subtypes of circulating B cells in these patients and compare them with the clinical severity of MS and NMOSD. For this purpose, peripheral blood mononuclear cell cultures from patients with MS (n=21), NMOSD (n=21), and healthy individuals (controls, n=10) were stimulated with PMA and ionomycin in the presence of brefeldin. After 4 hours, the percentage of different B cell subtypes (CD19⁺), based on the differential expression of CD27, CD38, CD138, HLA-DR, IgD, CCR9, and α4β7, as well as the cytokines IL-10 and IL-17, was determined by flow cytometry. Neurological disability severity was assessed using the EDSS scale. In the present study, a redistribution of transitional B cells was observed, with a reduction of HLA-DR⁺IgD⁺ phenotypes in both MS and NMOSD groups and an increase in the HLA-DR⁺IgD⁻ subtype in the NMOSD group, suggesting a possible immunological imbalance related to the loss of homeostasis. In NMOSD samples, memory B cells (CD27⁺CD38⁻HLA-DR⁺IgD⁻) showed a positive correlation with the degree of disability, indicating this subtype as a potential precursor of pathogenic plasmablasts. Regarding plasmablasts, the frequency of the most functionally active cell phenotype (CD138⁺) was not only higher in the patient groups but also positively correlated with the severity of neurological disabilities. Additionally, in NMOSD patients, higher frequencies of total B cells and HLA-DR⁺IgD⁻ plasmablasts were also associated with disease severity. In MS patients, the proportion of certain CCR9⁺α4β7⁺ B cell subtypes positively correlated with plasma LBP levels, an indirect marker of bacterial translocation. In contrast, in general, both the proportion of certain CCR9⁺α4β7⁻ B cell subtypes and, more notably, the intensity of CCR9 expression on B cells directly correlated with LBP. Finally, a lower percentage of IL-10⁺IL-17⁻ B cells was observed in NMOSD patients, whereas IL-10⁻IL-17⁺ B cells, particularly the memory subtype (CD27⁺CD38⁻), were increased in this patient group. Despite being preliminary, our findings suggest that disturbances in the composition of circulating B cells show both similarities and differences between the two patient groups, with a greater expansion of pro-inflammatory B cells in the NMOSD group.	pt_BR
dc.degree.country	Brasil	pt_BR
dc.description.sponsordocumentnumber	N/a	pt_BR
dc.description.abstractpt	Caracterizadas tanto pela destruicao da mielina quanto a degeneracao axonal, as doencas autoimunes desmielinizantes (DAD) do sistema nervoso (SNC) manifestam lesoes consideradas tipicas associadas a neuroinflamacao fomentada por celulas imunes inatas (microglia/macrofagos) e adaptativas (linfocitos T e B) dirigidas contra antigenos expressos tanto pelos neuronios quantos por celulas locais acessorias, os oligodendrocitos e astrocitos. Dentre as principais DAD do SNC, a Esclerose Multipla Remitente Recorrente (EMRR) e a mais prevalente, porem, nao a mais grave. Apesar de ser menos comum, pacientes com diagnostico de Transtorno do Espectro da Neuromielite Optica (NMOSD) possui pior desfecho, sendo essa relacao associada a maior contribuicao de celulas B. Apesar da EMRR ser considerada uma DAD mediada principalmente por subtipos de celulas T IL-17+ autorreativas, recentemente, celulas B tem associada a progressao da EMRR para a forma secundaria progressiva, caracterizada por neurodegeneracao irreversivel. Levando-se em consideracao a existencia de subtipos celulas B, o presente estudo tem como objetivo mapear subtipos imunogenicos e tolerogenicos de celulas B circulantes nesses pacientes e comparar com a gravidade clinica da EM e da NMOSD. Para tanto, culturas de celulas mononucleares do sangue periferico de pacientes com EM (n=21), NMOSD (n=21) e de individuos saudaveis (controle, n=10) foram estimuladas com PMA e Ionomicina na presenca de Brefeldina. Apos 4 horas, a porcentagem de diferentes subtipos de celulas B (CD19+), com base na expressao diferencial de CD27, CD38, CD138, HLA-DR, IgD, CCR9 e α4β7, assim como das citocinas IL-10 e IL-17, foi determinada por citometria de fluxo. A gravidade das incapacidades neurologicas foi determinada pela escala do EDSS. No presente estudo, uma redistribuicao das celulas B transicionais foi observada, com reducao dos fenotipos HLA-DR⁺IgD⁺ nos grupos EM e NMOSD e aumento do subtipo HLA-DR⁺IgD⁻ no grupo NMOSD, sugerindo um possível desbalanco imunologico relacionado a perda da homeostase. Nas amostras de NMOSD, celulas B de memoria (CD27⁺CD38-HLA-DR⁺IgD⁻) mostraram correlacao positiva com o grau de incapacidade, apontando esse subtipo como possivel precursor de plasmoblastos patogenicos. Com relacao aos plasmoblastos, a frequencia do fenotipo celular mais funcional (CD138⁺) não apenas foi maior nos grupos de pacientes, como tambem se mostrou positivamente correlacionada com a gravidade das incapacidades neurologicas. Ainda, em pacientes com NMOSD, maiores frequencias de celulas B totais e plasmoblastos HLA-DR⁺IgD⁻ tambem se associaram a gravidade da doenca. No paciente com EM, a porporcao de alguns subtipos de celulas B CCR9⁺α4β7⁺ foi positivamente correlacionada aos niveis plasmaticos de LBP, um marcador indireto de transmigracao bacteriana. Em contraste, de uma maneira geral, tanto a proporcao de alguns subtipos de celulas B CCR9+α4β7- e, principalmente, a intensidade de expressao de CCR9 sobre as celulas B correlacionou-se diretamente com LBP. Por fim, menor porcentagem de celulas B IL-10+IL-17- foi observada em pacienets com NMOSD, enquanto celulas B IL-10-IL-17+, especialmente do subtipo de memoria (CD27⁺CD38⁻), estavam aumentadas nesse grupo de pacientes. Apesar de preliminares, nossos achados sugerem que disturbios na composicao das celulas B circulantes possuem semelhanças e diferencas entre os ambos os grupos de pacientes, destacando-se uma maior expansao de celulas B pro-inflamatorias no grupo NMOSD.	pt_BR
dc.subject.pt	Sistema Nervoso Central	pt_BR
dc.subject.pt	SNC	pt_BR
dc.subject.pt	Esclerose Múltipla	pt_BR
dc.subject.pt	EM	pt_BR
dc.subject.pt	Transtorno do Espectro da Neuromielite Óptica	pt_BR
dc.subject.pt	Células B	pt_BR
dc.subject.decs	Sistema Nervoso Central	pt_BR
dc.subject.decs	Esclerose Múltipla	pt_BR
dc.subject.decs	Neuromielite Óptica	pt_BR
dc.subject.decs	Células B de Memória	pt_BR
dc.subject.decs	Linfócitos B	pt_BR